Evaluación de la eficacia biológica y de la sensibilidad de Aedes aegypti a los insecticidas piretroides deltametrina y ciflutrina durante el brote del virus Zika en Kuna Yala, Panamá / Evaluation of the biological efficacy and susceptibility in Aedes aegypti to the pyrethroid insecticides deltamethrin and cyfluthrin during the Zika virus outbreak in Kuna Yala, Panama

Introducción. El desarrollo de la resistencia a insecticidas de Aedes aegypti representa una gran amenaza para la salud pública. La vigilancia y el monitoreo de la eficacia biológica a los insecticidas y la sensibilidad de las poblaciones de Aedes aegypti es de fundamental importancia para prolongar la vida útil de estas moléculas. Objetivo. Evaluar la eficacia biológica de los insecticidas deltametrina y ciflutrina y la sensibilidad de poblaciones de Aedes aegypti a estos insecticidas durante el brote epidémico de virus del Zika en Kuna Yala, Panamá. Materiales y métodos. Se evaluó la eficacia biológica de la deltametrina y la ciflutrina, y la sensibilidad a estos insecticidas de poblaciones de la cepa Aedes aegypti Ustupo, mediante bioensayos estandarizados por la Organización Mundial de la Salud durante el brote epidémico de virus del Zika en Kuna Yala, Panamá. Resultados. En los bioensayos con Aedes aegypti Ustupo se observó posible resistencia a deltametrina y a ciflutrina con un porcentaje de mortalidad del 95,3 y 94 %, respectivamente. Se registró baja eficacia biológica con la cepa Aedes aegypti Ustupo para la deltametrina y la ciflutrina, con medias de porcentajes de mortalidad de 75 y 31,1 %, en el intradomicilio, mientras que en el peridomicilio fue de 63,7 y 26,1 %, respectivamente. Conclusión. Los resultados de este estudio representan un desafío que debe enfrentar el Programa Nacional de Control de Aedes para lograr cuidar y mantener el efecto tóxico de los insecticidas aplicados contra las poblaciones de Aedes. Es necesario que el Programa Nacional de Control de Aedes establezca unos lineamientos de manejo de la resistencia para caracterizarla y evaluar la distribución geográfica de las poblaciones afectadas. Lo anterior con el propósito de garantizar la sostenibilidad de las intervenciones antivectoriales contra las poblaciones de Aedes.

Introduction. The development of resistance to insecticides in Aedes aegypti represents a major threat to public health. Surveillance and monitoring of the biological efficacy and sensibility of Aedes aegypti populations to insecticides is fundamental to prolong the useful life of insecticide molecules. Objective. To evaluate the biological efficacy of deltamethrin and cyfluthrin and sensibility to insecticides in Aedes aegypti during the zika epidemic outbreak in Kuna Yala, Panama. Materials and methods. We assessed the biological efficacy of deltamethrin and cyfluthrin, and sensibility in the strain Aedes aegypti Ustupo using bioassays standardized by the World Health Organization during the Zika epidemic outbreak in Kuna Yala, Panama. Results. In the bioassays with Aedes aegypti Ustupo, we observed a possible resistance to deltamethrin and cyfluthrin with a mortality rate of 95,3 and 94%, respectively. The obtained results registered low biological efficacy of deltamethrin and cyfluthrin with average percentages of mortality of 75 and 31.1% in the intradomicile, and 63,7 and 26.1% in the peridomicile. Conclusion. The results of this study represent a challenge for the National Aedes Control Program to care for and maintain the toxic effect of insecticides applied against Aedes populations. There is a need for the National Aedes Control Program to establish some guidelines about resistance assessment and resistant populations' geographic distribution to guarantee the sustainability of anti-vector interventions against Aedes populations.

Evaluación de la sensibilidad a organofosforados en poblaciones de Aedes aegypti (L. ) (Diptera: Culicidae) del departamento de La Guajira, Colombia / Evaluation of susceptibility to organophosphates in populations of Aedes aegypti (L. ) (Diptera: Culicidae) in La Guajira, Colombia

Introducción. El dengue es un problema de salud pública para el departamento de La Guajira. El control se ha enfocado en el vector con el uso de insecticidas, entre ellos los organofosforados. Objetivo. Evaluar el estado de la sensibilidad a insecticidas organofosforados de quince poblaciones de Aedes aegypti (L.) en el departamento de La Guajira, Colombia. Materiales y métodos. Se realizaron bioensayos para temefos, malatión y pirimifos- metil en larvas de tercer estadio y mosquitos adultos de Ae. aegypti en los municipios de Albania, Barrancas, Dibulla, Distracción, El Molino, Fonseca, Hatonuevo, La Jagua del Pilar, Maicao, Manaure, Riohacha, San Juan del Cesar, Uribia, Urumita y Villanueva, siguiendo la metodología de la Organización Mundial de la Salud (OMS) y la técnica de botellas usando la guía de los de los Centers for Disease Control and Prevention, respectivamente. Se determinó la sensibilidad por medio de la relación de resistencia a CL50 y CL95 (RRCL50, RRCL95) para temefos y a dosis y tiempo diagnóstico para temefos, malatión y pirimifos-metil en las poblaciones de campo evaluadas, usando como control la cepa sensible Rockefeller. Resultados. Las 15 poblaciones del departamento de La Guajira son sensibles a: temefos (relación de la resistencia a CL50<5,0; relación de resistencia a CL95<5,0; 98 a 100 % de mortalidad); pirimifos-metil (99 a 100 % de mortalidad) y malatión (100 % de mortalidad). Conclusión. Con base en los resultados obtenidos, es factible el uso de temefos, malatión y pirimifos-metil para el control de Ae. aegypti en las poblaciones evaluadas.

Introduction. Dengue is a public health problem in La Guajira region. Control has focused on the vector using insecticides, including organophosphates. Objective. To evaluate the state of susceptibility to organophosphates insecticides in fifteen Aedes aegypti (L.) populations in La Guajira, Colombia. Materials and methods. We collected samples of third-instar larvae and adult mosquitoes of Ae. aegypti in the municipalities of Albania, Barrancas, Dibulla, Distracción, El Molino, Fonseca, Hatonuevo, La Jagua del Pilar, Maicao, Manaure, Riohacha, San Juan del Cesar, Uribia, Urumita, Villanueva. Bioassays for temefos, malathion, and pirimiphos-methyl were carried out following the methodology of the World Health Organization, and the bottle technique using the guidance of the Centers for Disease Control and Prevention. Susceptibility to temefos was determined through the resistance ratio between lethal concentration 50 and lethal concentration 95; for the compounds temefos, malathion and pirimiphos-methyl, susceptibility was calculated using diagnostic dose and diagnostic time in the populations evaluated. Rockefeller susceptible strain was used as a control. Results. All evaluated populations of Ae. aegypti from La Guajira were found to be susceptible to temefos (ratio resistance to CL50<5.0; ratio resistance to CL95<5.0; 98 - 100 % mortality); pirimiphosmethyl (99 - 100 % mortality), and malathion (100 % mortality). Conclusion. Based on the results, the use of temefos, malathion, and pirimiphosmethyl is feasible for the control of Ae. aegypti in the evaluated populations.

Impact of nitrogen and phosphorus fertilizers on Cry1Ac protein contents in transgenic cotton / Impacto de fertilizantes de nitrogênio e fósforo nos conteúdos de proteína Cry1Ac em algodão transgênico

Abstract Application of different fertilizers to check the efficiency of expression of Bt (Bacillus thuringiensis) gene in one of the leading commercialized crops (cotton) against Lepidopteran species is of great concern. The expression of Cry protein level can be controlled by the improvement of nutrients levels. Therefore, the myth of response of Cry toxin to different combinations of NP fertilizers was explored in three Bt cotton cultivars. Combinations include three levels of nitrogen and three levels of phosphorus fertilizers. Immunostrips and Cry gene(s) specific primer based PCR (Polymerase Chain Reaction) analysis were used for the presence of Bt gene that unveiled the presence of Cry1Ac gene only. Further, the ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) kit was used to quantify the expression of Cry1Ac protein. Under various NP fertilizers rates, the level of toxin protein exhibited highly significant differences. The highest toxin level mean was found to be 2.3740 and 2.1732 µg/g under the treatment of N150P75 kg ha-1 combination while the lowest toxin level mean was found to be 0.9158 and 0.7641 µg/g at the N50P25 kg ha-1 level at 80 and 120 DAS (Days After Sowing), respectively. It was concluded from the research that the usage of NP fertilizers has a positive relation with the expression of Cry1Ac toxin in Bt cotton. We recommend using the N150P50 kg ha-1 level as the most economical and practicable fertilizer instead of the standard dose N100P50 kg ha-1 to get the desired level of Cry1Ac level for long lasting plant resistance (<1.5). The revised dose of fertilizer may help farmers to avoid the cross-resistance development in contradiction of insect pests.

Resumo A aplicação de diferentes fertilizantes para verificar a eficiência da expressão do gene Bt (Bacillus thuringiensis) em uma das principais culturas comercializadas (algodão) contra espécies de lepidópteros é uma grande preocupação. A expressão do nível de proteína Cry pode ser controlada pela melhoria dos níveis de nutrientes. Portanto, o mito da resposta da toxina Cry a diferentes combinações de fertilizantes NP foi explorado em três cultivares de algodão Bt. As combinações incluem três níveis de nitrogênio e três níveis de fertilizantes de fósforo. A análise de PCR (reação em cadeia da polimerase) específica para o gene (s) Immunostrips e Cry (s) foi usada para a presença do gene Bt que revelou a presença do gene Cry1Ac apenas. Além disso, o kit ELISA (ensaio de imunoabsorção enzimática) foi usado para quantificar a expressão da proteína Cry1Ac. Sob várias taxas de fertilizantes NP, o nível de proteína de toxina exibiu diferenças altamente significativas. A média do nível mais alto de toxina foi de 2,3740 e 2,1732 µg / g sob o tratamento da combinação N150P75 kg ha-1, enquanto a média do nível mais baixo de toxina foi de 0,9158 e 0,7641 µg / g no nível de N50P25 kg ha-1 em 80 e 120 DAS (dias após a semeadura), respectivamente. Concluiu-se com a pesquisa que o uso de fertilizantes NP tem relação positiva com a expressão da toxina Cry1Ac no algodão Bt. Recomendamos o uso do nível de N150P50 kg ha-1 como o fertilizante mais econômico e praticável em vez da dose padrão N100P50 kg ha-1 para obter o nível desejado de nível de Cry1Ac para resistência de planta de longa duração (<1,5). A dose revisada de fertilizante pode ajudar os agricultores a evitar o desenvolvimento de resistência cruzada em contradição com as pragas de insetos.

Monitoring of Insecticides resistance against cotton Jassid (Amrasca biguttutla biguttutla) under laboratory conditions / Monitoramento da resistência de inseticidas contra o algodão Jassid (Amrasca biguttutla biguttutla) em condições laboratoriais

Abstract Development of insecticides resistance mainly hinge with managements techniques for the control of Jassid, Amrasca biguttutla biguttutla. Five insecticides were applied against field collected and laboratory rared jassid populations during the years of 2017 to 2019 to profile their resistance level against field population of jassid through leaf dip method. Very low resistance level was found in jassid against confidor whereas high level of resistance was observed by pyriproxyfen against other test insecticides. Gradual resistance was observed against diafenthiuron. It is concluded that for the management of Jassid repetition of same insecticide should be avoided. The use of confidor may be reduced to overcome resistance against Jassid.

Resumo Desenvolvimento da resistência a inseticidas principalmente em dobradiça com técnicas de manejo para o controle de jassid, Amrasca biguttutla biguttutla. Cinco inseticidas foram aplicados contra populações de jassídeos coletados em campo e em laboratório durante os anos de 2017 a 2019 para traçar o perfil de seu nível de resistência contra populações de jassídeos em campo através do método de imersão nas folhas. Nível de resistência muito baixo foi encontrado em jassid contra confidor, enquanto alto nível de resistência foi observado por piriproxifeno contra outros inseticidas de teste. Resistência gradual foi observada contra o diafenthiuron. Conclui-se que, para o manejo do jassid, a repetição do mesmo inseticida deve ser evitada. O uso de confidor pode ser reduzido para superar a resistência contra jassid.

Monitoring of Insecticides resistance against cotton Jassid (Amrasca biguttutla biguttutla) under laboratory conditions / Monitoramento da resistência de inseticidas contra o algodão Jassid (Amrasca biguttutla biguttutla) em condições laboratoriais

Development of insecticides resistance mainly hinge with managements techniques for the control of Jassid, Amrasca biguttutla biguttutla. Five insecticides were applied against field collected and laboratory rared jassid populations during the years of 2017 to 2019 to profile their resistance level against field population of jassid through leaf dip method. Very low resistance level was found in jassid against confidor whereas high level of resistance was observed by pyriproxyfen against other test insecticides. Gradual resistance was observed against diafenthiuron. It is concluded that for the management of Jassid repetition of same insecticide should be avoided. The use of confidor may be reduced to overcome resistance against Jassid.

Desenvolvimento da resistência a inseticidas principalmente em dobradiça com técnicas de manejo para o controle de jassid, Amrasca biguttutla biguttutla. Cinco inseticidas foram aplicados contra populações de jassídeos coletados em campo e em laboratório durante os anos de 2017 a 2019 para traçar o perfil de seu nível de resistência contra populações de jassídeos em campo através do método de imersão nas folhas. Nível de resistência muito baixo foi encontrado em jassid contra confidor, enquanto alto nível de resistência foi observado por piriproxifeno contra outros inseticidas de teste. Resistência gradual foi observada contra o diafenthiuron. Conclui-se que, para o manejo do jassid, a repetição do mesmo inseticida deve ser evitada. O uso de confidor pode ser reduzido para superar a resistência contra jassid.

Resistência das populações de Aedes (Stegomyia) aegypti (Linnaeus, 1762) (Insecta, Diptera, Culicidae) aos inseticidas utilizados para o controle: estado da arte do conhecimento / Resistance of Aedes (Stegomyia) aegypti (Linnaeus, 1762) (Insecta, Diptera, Culicidae) populations to insecticides used for control: art state of knowledge

Introdução: cerca de quatro bilhões de pessoas residem em áreas com risco de dengue, uma arbovirose transmitida pelo mosquito Aedes (Stegomyia) aegypti (Linnaeus, 1762) (Insecta, Diptera, Culicidae). Na tentativa de combater esse vetor e reduzir a disseminação da dengue, o meio de controle vetorial frequentemente utilizado são os inseticidas. Entretanto, o uso indiscriminado destes no controle do mosquito está relacionado aos mecanismos de resistência desse vetor. Objetivo: mapear as evidências científicas relacionadas à resistência do mosquito A. aegypti aos inseticidas utilizados para o controle populacional. Metodologia: revisão de escopo, segundo metodologia Instituto Joana Briggs, em bases de dados indexadas: PubMed, Embase, CINAHL, Web of Science, SCOPUS e Biblioteca Virtual em Saúde. Através do mnemônico PCC (população, conceito e contexto), elaborou-se a estratégia de busca utilizando descritores do Decs e Mesh. Resultados: foram encontrados 1.631 estudos sobre a temática. Após critérios de elegibilidade e seleção, foram incluídos 30 estudos específicos sobre resistência do Aedes aegypti a inseticidas foram incluídos na revisão. A maior parte tratou de forma experimental e 28 (93,3%) estudos trabalharam o controle químico. Em relação à resistência a inseticidas, em 20 estudos (66,6%) constatou-se resistência metabólica e em 9 (30%) a resistência mediada pela alteração da variabilidade genética. Os estudos que observaram mutação não deixam claro se a mutação gênica é especificamente devido à ação mutagênica aos inseticidas. Conclusões:o A. aegypti desenvolve adaptações que lhe conferem resistência aos inseticidas, sendo que esses mecanismos de resistência estão relacionados à variabilidade genética e a adaptações metabólicas, que são transmitidas a seus descendentes ao longo das gerações. Assim, torna-se necessário um avanço nos estudos visando não apenas identificar e explicar os mecanismos de resistência, mas encontrar meios alternativos de manejo que possam controlar o inseto sem ocasionar resistência aos mesmos.

Introduction: about four billion people live in areas at risk of dengue, an arbovirus transmitted by the Aedes (Stegomyia) aegypti (Linnaeus, 1762) (Insecta, Diptera, Culicidae). To combat this vector and reduce the spread of dengue, the means of vector control often used are insecticides. However, their indiscriminate use in mosquito control is related to the resistance mechanisms of this vector. Objective: to map the scientific evidence related to the resistance of the Aedes aegypti mosquito to the insecticides used to control dengue. Methodology: scope review, according to the Joana Briggs Institute methodology, in indexed databases: PubMed, Embase, CINAHL, Web of Science, SCOPUS and Virtual Health Library. Using the mnemonic PCC (population, concept and context), a search strategy was developed using Decs and Mesh descriptors. Results: 1,631 studies on the subject were found. After eligibility and selection criteria, 30 specific studies on Aedes aegypti resistance to insecticide were included in the review . Most treated experimentally and 28 (93.3%) studies worked on chemical control. Regarding the resistance to insecticide, in 20 studies (66.6%) there was found metabolic resistance and in 9 (30%) resistance mediated by modification on the genetic variability. Studies that have looked at mutation do not make it clear whether the gene mutation is specifically due to mutagenic action of insecticides. Conclusions: Aedes aegypti develops adaptations that gives them resistance to insecticides, and these resistance mechanisms are related to genetic variability and to metabolic adaptations, which are transmitted to its descendants over generations. Thus, it is necessary to perform advance in studies aiming not only to identify and explain the resistance mechanisms, but to find alternative means of management that can control the insect without causing resistance to them.

Advances in receptor-mediated resistance mechanisms of Lepidopteran insects to Bacillus thuringiensis toxin / 生物工程学报

Bacillus thuringiensis is widely used as an insecticide which is safe and environmentally friendly to humans and animals. One of the important insecticidal mechanisms is the binding of Bt toxins to specific toxin receptors in insect midgut and forming a toxin perforation which eventually leads to insect death. The resistance of target pests to Bt toxins is an important factor hampering the long-term effective cultivation of Bt crops and the continuous use of Bt toxins. This review summarizes the mechanism of insect resistance to Bt toxins from the perspective of important Bt toxin receptors in midgut cells of Lepidopteran insects, which may facilitate the in-depth study of Bt resistance mechanism and pest control.

Estruturação genética e distribuição de mutações kdr em populações de Aedes aegypti (Linnaeus 1762) do estado do Amapá / Genetic structuring and distribution of kdr mutations in populations of Aedes aegypti (Linnaeus 1762) in the state of Amapá

O mosquito Aedes aegypti é vetor competente para a transmissão dos vírus dengue, chikungunya, Zika e febre amarela. O controle químico do vetor é amplamente utilizado, mas vem sendo ameaçado pela disseminação da resistência a inseticidas (RI), caracterizando-se pela seleção de alterações no comportamento ou na fisiologia do mosquito, que fazem com que o inseticida não atinja ou não encontre seu alvo no organismo do inseto. A disseminação da RI ocorre usualmente pelo fluxo gênico entre populações, que no caso do Ae. aegypti é facilitado pela dispersão passiva de seus ovos aderidos a mercadorias. A estruturação genética das populações naturais é, portanto, um fator fundamental que facilita ou dificulta a disseminação de alelos de resistência. Entre os principais mecanismos de RI estão as alterações no gene do canal de sódio regulado por voltagem (NaV), que causam resistência ao efeito knockdown de piretroides, sendo conhecidas como mutações kdr. Populações de Ae. aegypti das localidades de Macapá e Oiapoque, no estado do Amapá, eram geneticamente distintas e apresentavam alelos kdr diferenciados, muito provavelmente devido ao baixo fluxo gênico entre essas duas populações, dificultado pelo acesso terrestre entre essas duas localidades, feito por uma única rodovia que cruza a densa Floresta Amazônica. Não se conhecia, no entanto, como seria a estruturação genética entre as populações de localidades ao longo daquela rodovia e, tampouco sobre ocorrência de mutações kdr. Por isso, avaliamos a frequência das principais mutações kdr em três sítios polimórficos (V410L, V1016I e F1534C) no gene NaV de populações de Ae. aegypti de seis localidades do estado do Amapá (Oiapoque, Calçoene, Porto Grande, Ferreira Gomes, Tartarugalzinho e Macapá), através de genotipagem por qPCR em tempo real. Adicionalmente, investigamos a diversidade e a estruturação genética destas populações via genotipagem de 12 loci de microssatélites. Os alelos kdr R1 (mutante no sítio 1534) e R2 (mutante nos três sítios) foram observados nas seis populações, sendo que a de Oiapoque apresentou a maior frequência do kdr R2, enquanto o kdr R1 foi mais frequente na de Macapá. Genótipos kdr raros em demais regiões do Brasil, sugestivos de duplicações gênicas, foram encontrados em Ae. aegypti de Oiapoque e Calçoene. As análises de microssatélites mostraram baixa ou moderada diferenciação genética par-a-par, sendo que Oiapoque foi a população geneticamente mais distinta das demais e formou praticamente um único grupo genético em uma das análises de estruturação genética. Análise de Componentes Principais (DAPC) também sugeriu a população de Calçoene geneticamente diferenciada das demais, enquanto as outras populações mostraram-se mais similares entre si, sugerindo alto fluxo gênico entre elas. Ainda que a população de Oiapoque seja a mais diferenciada e estruturada, nosso estudo indica que há fluxo gênico entre esta e as demais ao longo da estrada BR-156 (AP), colaborando com a disseminação de alelos vindos da população da Guiana Francesa. Idealmente, medidas de controle químico do vetor devem ser pensadas conjuntamente entre as autoridades de ambos os lados da fronteira binacional.(AU)

Locomotor activity in Aedes aegypti with different insecticide resistance profiles

ABSTRACT OBJECTIVE: To evaluate locomotor activity in four field populations of Ae. aegypti with different insecticide resistance profiles from the state of São Paulo for two years. METHODS: This study comprised the susceptible Rockefeller strain and four populations from São Paulo, Brazil: two considered populations with "reduced susceptibility" to pyrethroids (Campinas and Marília), and two "resistant populations" (Santos and Ribeirão Preto). First, 2016 and 2017 eggs from these five populations were hatched in laboratory. Virgin females underwent experiments under laboratory conditions at 25°C, with 12:12h light/dark (LD) photoperiod; 24-hour individual activity was recorded using a locomotor activity monitor (LAM). RESULTS: In females from 2016 field populations, both resistant populations showed significant more locomotor activity than the two reduced susceptibility populations and the Rockefeller strain (p < 0.05). As for females from 2017 field populations, reduced susceptibility populations showed a significant increased locomotor activity than the Rockefeller strain, but no significant difference when compared to Santos resistant population (p > 0.05). CONCLUSIONS: Our results indicate that insecticide-resistant Ae. aegypti populations show increased locomotor activity, which may affect the transmission dynamics of their arboviruses.

Evaluation of the insecticide susceptibility profile in Cimex lectularius (Hemiptera: Cimicidae) in Belo Horizonte (Brazil)

Abstract INTRODUCTION: Since 2013, major Cimex lectularius infestations have been detected in public shelters in Belo Horizonte (Brazil). Due to this, insecticide resistance has been investigated as one of the possible causes for the failure to control bedbugs. METHODS: Cimicids were subjected to bioassays according to the World Health Organization recommendations using deltamethrin and all commercial insecticides available for control of Cimex in Brazil. RESULTS: Cimicids were deltamethrin resistant and presented indicative of resistance to other insecticides, except for propoxur 1%. CONCLUSIONS: The commercial insecticides have a limited effect on bedbug populations, which may justify the unsatisfactory control observed in the shelters studied.

Molecular variation of Plasmodium vivax dehydrofolate reductase in Mexico and Nicaragua contrasts with that occurring in South America / Variación molecular de la dehidrofolato reductasa de Plasmodium vivax en México y Nicaragua contrasta con la que ocurre en Sudamérica

Abstract: Objective: To research mutations associated to pyrimethamine resistance in dihydrofolate reductase (pvdhfr) of Plasmodium vivax from Mexico and Nicaragua and compare it to that reported in the rest of America. Materials and methods: Genomic DNA was obtained from P. vivax-infected blood samples. A pvdhfr gene fragment was amplified and sequenced. The identified gene variations were compared to those observed in other affected sites of America. Results: No mutations in pvdhfr were detected in P. vivax from Mexico and Nicaragua. One synonymous change and variation in the repeat domain was detected in Nicaraguan parasites. In South America, a high frequency of variant residues 58R and 117N associated to pyrimethamine resistance was reported. Conclusions: The lack of polymorphisms associated with pyrimethamine resistance suggests that drug-resistant P. vivax has not penetrated Mesoamerica, nor have local parasites been under selective pressure. These data contribute to establish the basis for the epidemiological surveillance of drug resistance.

Resumen: Objetivo: Determinar mutaciones en la dihydrofolato reductasa deP. vivax (Pvdhfr) en parásitos de México y Nicaragua, y comparar con lo reportado en América. Material y métodos: Del ADN de sangres infectadas con P. vivax de pacientes, el gen pvdhfr se amplifico y secuenció, y se contrastócon lo observado en América. Resultados: No se detectaron mutaciones asociadas con la resistencia debida a pirimetamina. Los parásitos de Nicaragua tuvieron una mutación sinónima y variación en la región repetida. Se reportaron frecuentes mutaciones asociadas con la resistencia a la pirimetamina en Sudamérica. Conclusiones: La ausencia de polimorfismos en Pvdhfr sugiere que no se han seleccionado ni introducido parásitos resistentes en la zona de estudio, lo que resulta muy útil para la vigilancia epidemiológica.

Determination of insecticides' lethal concentrations and metabolic enzyme levels in Triatoma dimidiata / Determinación de concentraciones letales y niveles de enzimas metabólicas de insecticidas en Triatoma dimidiata

Abstract: Objective: The feasibility of the use of WHO impregnated paper and biochemical assays to determine lethal concentrations (LC50 and LC99) and insecticide metabolic enzyme levels of Triatoma dimidiata. Materials and methods: LC50 and LC99 were calculated with WHO papers impregnated at different concentrations of malathion, propoxur and deltamethrin; the percentage of insensitive acetylcholinesterase (iAChE); and the levels of esterases, glutathione S-transferases, and monooxygenases in laboratory nymphs of the first stage (5 to 7 days), were undertaken using the WHO biochemical assays. Results: Respectively the LC50 and LC99 µg/cm2 obtained for malathion were 43.83 and 114.38, propoxur 4.71 and 19.29, and deltamethrin 5.80 and 40.46. A 30% of the population had an iAChE, and only a few individuals had high P450 and β-eterase levels. Conclusion: Impregnated papers and biochemical tests developed by WHO for other insects, proved to be feasible methods in monitoring insecticide resistance and metabolic enzymes involved in T. dimidiata.

Resumen: Objetivo: La factibilidad de usar los papeles impregnados y ensayos bioquímicos según la OMS para determinar concentraciones letales (CL50 y CL99) y niveles enzimáticos en la resistencia a insecticidas en Triatoma dimidiata. Material y métodos: Se calcularon la CL50 y CL99 con papeles impregnados según la OMS a diferentes concentraciones de malatión, propoxur y deltametrina; el porcentaje de acetilcolinesterasa insensible (iAChE); y los niveles de esterasas, glutatión S-transferasas, y monooxigenasas en ninfas de laboratorio del estadio I (5-7 días) se determinaron usando los ensayos bioquímicos según la OMS. Resultados: Se obtuvieron las CL50 y CL99 µg / cm2 respectivamente para malatión 43.83 y 114.38, propoxur 4.71 y 19.29, y deltametrina 5.80 y 40.46. Un 30% de las chinches tuvo iAChE, y sólo pocos individuos tuvieron niveles superiores de P450 y β-eterasas. Conclusión: Los papeles impregnados y ensayos bioquímicos que describe la OMS para otros insectos demostraron ser métodos factibles para monitorear la resistencia a insecticidas y las enzimas metabólicas involucradas en T. dimidiata.

Nebulización térmica intradomiciliar de la mezcla de flupyradifurona y transflutrina en mosquitos Aedes aegypti susceptibles y resistentes a piretroides en el Sur de México / Indoor thermal fogging of the mixture of flupyradifurone and transflutrin on Aedes aegypti mosquitoes susceptible and resistant to pyrethroids in southern Mexico

Resumen: Objetivo: Evaluar la efectividad de la mezcla de flupyradifurona 26.3 g/L y transflutrina 52.5 g/L aplicada como niebla térmica a mosquitos Aedes vectores de virus dengue, Zika y chikungunya. Material y métodos: Se colocaron grupos de 15 mosquitos de Ae. aegypti (susceptibles y resistentes a piretroides) dentro de jaulas, en sala, recámara y cocina. Posteriormente, se aplicó la mezcla de flupyradifurona y transflutrina dentro de las viviendas a una dosis de 2 y 4 mg/m3, respectivamente. Resultados: La mezcla de flupyradifurona y transflutrina causó mortalidades de 97 a 100% sobre las cepas de mosquitos Aedes y su efectividad fue la misma en los diferentes compartimentos de las viviendas. Conclusiones: La mezcla de flupyradifurona y transflutrina, aplicada en niebla térmica, es una herramienta prometedora para el control de poblaciones de mosquitos Aedes independientemente de su estado de resistencia a insecticidas.

Abstract: Objective: To evaluate the efficacy of thermal fogging of a mixture of flupyrafirudone (26.3 g/L) and transfluthrin (52.5 g/L) against dengue, Zika y chikungunya Aedes mosquito vectors. Materials and methods: Groups of 15 caged Ae. aegypti (susceptible and pyrethroid resistant) mosquitoes were placed in living room, kitchen and bedroom inside houses, after which a dose of 2 and 4 mg/m3 of flupyradifurone and transfluthrine, respectively, was applied as thermal fog. After one hour of exposure mosquitoes were transferred to the laboratory and mortality was recorded after 24 h. Results: The mixture killed 97 to 100% of mosquitoes from the strains and the efficacy was similar independently of their place within the premises. Conclusions: The mixture of flupyrafirudone and transfluthrin applied as thermal fog is a promising tool to control Aedes mosquito populations independently of the pyrethroid-insecticide resistance status.

Resistencia a insecticidas en Aedes aegypti y Aedes albopictus (Diptera: Culicidae) de Tapachula, Chiapas, México / Insecticide resistance in Aedes aegypti and Ae. albopictus (Diptera: Culicidae) populations from Tapachula, Chiapas, Mexico

Resumen: Objetivo: Determinar la resistencia a insecticidas en Ae. aegypti y Ae. albopictus de Tapachula, Chiapas, México. Material y métodos: Se utilizaron ovitrampas para obtener huevos de mosquitos Aedes y se realizaron pruebas de susceptibilidad (CDC) y ensayos enzimáticos con la primera generación. Resultados: Aedes aegypti mostró resistencia a deltametrina, permetrina, malatión, clorpirifos, temefos y a bendiocarb (CARB), mientras que Aedes albopictus a malatión y en menor grado a cloripirifos, temefos, permetrina y deltametrina. Ambas especies mostraron altos niveles de enzimas como citocomo P450 y glutatión S-tranferasa, mientras que los niveles de esterasas variaron por especie y sitio muestreado. Se detectó acetilcolinesterasa insensible a insecticidas en ambas especies. Conclusión: En un hábitat urbano de Tapachula, Chiapas, México donde se aplica control con insecticidas Ae. aegypti y Ae. albopictus sólo son susceptibles al propoxur.

Abstract: Objective: To determine the insecticide resistance status of Ae. aegypti and Ae. albopictus from Tapachula, México. Materials and methods: Mosquito eggs were collected with the use of ovitraps and CDC susceptibility bioassays and biochemical assays were conducted to determine resistance levels and resistance mechanisms, respectively. Results: Ae. aegypti showed resistance to deltamethrin and permethrin (PYRs), malathion, chlorpyrifos and temephos (OP), and to bendiocarb (CARB), while Ae. albopictus showed resistance to malathion and to a lesser intensity to chlorypirifos, temephos, permethrin and deltamethrin. Both species showed high levels of P450 and GSTs, while levels of esterases varied by species and collection site. Altered acethilcholinesterase was detected in both species. Conclusion: In an urban habitat from Tapachula, Chiapas, Mexico where vector control using insecticides takes place, Ae. aegypti and Ae. albopictus are only susceptible to propoxur.

Susceptibility of soybean looper to lufenuron and spinosad / Susceptibilidade da lagarta falsa-medideira a lufenuron e espinosade

The soybean looper (Chrysodeixis includens) is an important defoliation pest in crops such as soybean and cotton in Brazil. Its main control tactic is chemical insecticides. Considering the importance of chemical control for this pest, monitoring the susceptibility of C. includens populations is strategic for an efficient Insect Resistance Management. Therefore, the objective of this study was to evaluate the susceptibility levels of C. includens populations in the state of Mato Grosso - Brazil to lufenuron and spinosad. Seven populations were collected in soybean fields around the state. For the bioassays, early L3 larvae were exposed to insecticides using the diet-overlay method. Although the compounds have distinct modes of action, Tangará da Serra population had the highest resistance ratios for lufenuron (11.62) and spinosad (7.84), compared to laboratory population (susceptibility reference). Even with low resistance levels, it is necessary to maintain regional monitoring of C. includens susceptibility to the evaluated insecticides, as well as to extend the range of molecules monitored.(AU)

A lagarta falsa-medideira (Chrysodeixis includens) é uma importante praga desfolhadora em culturas como soja e algodão no Brasil e seu principal método de controle é o uso de inseticidas químicos. Considerando a importância do controle químico para essa praga, o monitoramento da suscetibilidade de populações de C. includens é estratégico para um eficiente programa de Manejo da Resistência de Insetos. Portanto, objetivou-se com este estudo avaliar os níveis de suscetibilidade de populações de C. includens no estado de Mato Grosso, Brasil, aos inseticidas lufenurom e espinosade. Sete populações foram coletadas em cultivos de soja ao longo do estado. Para os bioensaios, lagartas em terceiro ínstar foram expostas aos inseticidas utilizando o método de contaminação superficial de dieta. Embora os compostos apresentem modos de ação distintos, a população de Tangará da Serra obteve as maiores razões de resistência para lufenurom (11,62) e espinosade (7,84) em relação à população de laboratório (referência de suscetibilidade). Apesar dos níveis de resistência terem sido baixos, é necessário manter a manutenção do monitoramento dos níveis de suscetibilidade aos inseticidas avaliados, assim como ampliar a gama de moléculas monitoradas.(AU)

Efficacy of factory-treated and dip-it-yourself long lasting insecticide-treated bednets against cutaneous leishmaniasis vectors in the sub-Andean region of Colombia: results after two years of use

BACKGROUND Long lasting insecticide-treated nets (LLINs) may be effective for vector control of cutaneous leishmaniasis (CL). Their efficacy, however, has not been sufficiently evaluated. OBJECTIVE To evaluate the large-scale efficacy of LLINs on Lutzomyia longiflocosa entomological parameters up to two years post-intervention in the sub-Andean region of Colombia. METHODS A matched-triplet cluster-randomised study of 21 rural settlements, matched by pre-intervention L. longiflocosa indoor density was used to compare three interventions: dip it yourself (DIY) lambda-cyhalothrin LLIN, deltamethrin LLIN, and untreated nets (control). Sand fly indoor density, feeding success, and parity were recorded using CDC light trap collections at 1, 6, 12, and 24 months post-intervention. FINDINGS Both LLINs reduced significantly (74-76%) the indoor density and the proportion of fully engorged sand flies up to two years post-intervention without differences between them. Residual lethal effects of both LLINs and the use of all nets remained high throughout the two-year evaluation period. CONCLUSIONS Both LLINs demonstrated high efficacy against L. longiflocosa indoors. Therefore, the deployment of these LLINs could have a significant impact on the reduction of CL transmission in the sub-Andean region. The DIY lambda-cyhalothrin kit may be used to convert untreated nets to LLINs increasing coverage.

Susceptibility of Aedes aegypti populations to pyriproxyfen in the Federal District of Brazil

Abstract INTRODUCTION: In Brasilia, pyriproxyfen (PPF; 0.01 mg/L) has been used for the larval control of Aedes aegypti mosquitoes since 2016. Information on the susceptibility of Ae. aegypti to PPF, and the development of resistance in populations from the Federal District of Brazil (FD) is limited. It is essential to monitor the susceptibility of Ae. aegypti to insecticides in order to improve vector control strategies. This study aimed to evaluate the susceptibility of Ae. aegypti populations from five areas of Brasilia to PPF. METHODS: We performed dose-response tests to estimate the emergence inhibition and resistance ratio of each field population, including the Rockefeller reference population. We also analyzed egg positivity, and the density and mortality of larvae and pupae. RESULTS: Populations from Vila Planalto (RR50=1.7), Regiment Guards Cavalry (RR50=2.5), and Sub-secretary of Justice Complex (RR50=3.7) presented high susceptibility to PPF, while the RR values of populations from Lago Norte (RR50=7.7) and Varjão (RR50=5.9) were moderately high, suggesting the emergence of insipient resistance to PPF in Brasilia. At 30 ng/mL, the highest larvae mortality rate was 2.7% for the population from Lago Norte, while that of pupae was 92.1% for Varjão and Vila Planalto. CONCLUSIONS: The five populations of Ae. aegypti from the FD are susceptible to PPF and there is a need to monitor the susceptibility of Ae. aegypti in new areas of the FD.

Spatiotemporal multiple insecticide resistance in Aedes aegypti populations in French Guiana: need for alternative vector control

BACKGROUND Aedes aegypti is the sole vector of urban arboviruses in French Guiana. Overtime, the species has been responsible for the transmission of viruses during yellow fever, dengue, chikungunya and Zika outbreaks. Decades of vector control have produced resistant populations to deltamethrin, the sole molecule available to control adult mosquitoes in this French Territory. OBJECTIVES Our surveillance aimed to provide public health authorities with data on insecticide resistance in Ae. aegypti populations and other species of interest in French Guiana. Monitoring resistance to the insecticide used for vector control and to other molecule is a key component to develop an insecticide resistance management plan. METHODS In 2009, we started to monitor resistance phenotypes to deltamethrin and target-site mechanisms in Ae. aegypti populations across the territory using the WHO impregnated paper test and allelic discrimination assay. FINDINGS Eight years surveillance revealed well-installed resistance and the dramatic increase of alleles on the sodium voltage-gated gene, known to confer resistance to pyrethroids (PY). In addition, we observed that populations were resistant to malathion (organophosphorous, OP) and alpha-cypermethrin (PY). Some resistance was also detected to molecules from the carbamate family. Finally, those populations somehow recovered susceptibility against fenitrothion (OP). In addition, other species distributed in urban areas revealed to be also resistant to pyrethroids. CONCLUSION The resistance level can jeopardize the efficiency of chemical adult control in absence of other alternatives and conducts to strongly rely on larval control measures to reduce mosquito burden. Vector control strategies need to evolve to maintain or regain efficacy during epidemics.

Investigação do comportamento de tolerância ao N, N- dietilmetilbenzamida (DEET) em populações de Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) / Investigation of tolerance behavior to N, N-diethylmethylbenzamide (DEET) in populations of Aedes aegypti (Diptera: Culicidae)

Aedes aegypti é um mosquito de grande interesse para saúde pública, pois é o vetor de arbovírus, como dengue, chikungunya e Zika. Para o controle desse vetor, são utilizados o controle biológico, mecânico e o controle químico, com utilização de inseticidas e repelentes. Os repelentes são considerados uma das melhores formas de se evitar as picadas das fêmeas, sendo os mais comercializados aqueles que possuem N,N-dietilmetilbenzamida (DEET) na fórmula, além de serem um dos mais estudados atualmente. Entretanto a resitência a alguns inseticidas como o piretroide, pode levar à alteração na atividade locomotora dos mosquitos. Deste modo, o presente trabalho tem como objetivo avaliar aspectos relacionados à tolerância ao DEET e à resistência a xenobióticos em cepas Ae. aegypti de campo (Laranjeiras) e de laboratório (Rockefeller). Foram realizados testes de repelência com Ae. aegypti para a resposta ao odor humano. Em cada teste, foram utilizadas 50 fêmeas, totalizando 700 fêmeas da população Laranjeiras e 1500 fêmeas para a população Rockefeller. As fêmeas foram colocadas em gaiolas de teste por cerca de duas horas, a fim de se adaptarem ao ambiente. Posteriormente, foi realizado o teste de repelência, que consistiu na exposição do mosquito a 0,5 mL de DEET (10% em etanol), este foi aplicado uniformemente pelo antebraço humano. Para diagnosticar a presença da mutação kdr na população de Laranjeiras foram analisadas 32 fêmeas dessa população. Para avaliar a atividade locomotora das fêmeas de Ae. aegypti Rockefeller e de Laranjeiras, foi utilizado o Drosophila Activity Monitor - Trikinetics. No período de setembro a novembro de 2019, foram instaladas 290 ovitrampas no município de Laranjeiras - SE, tendo sido verificado um total de 80,3% de palhetas com presença de ovos de Aedes, contabilizando 15.940 ovos. Após a realização dos bioensaios, foi possivel observar maior sensibilidade ao DEET nas fêmeas provinientes do campo. Além disso, também foi possivel observar a presença da mutação kdr e uma maior atividade locomotora nessa população. Dessa forma, nossos resultados sugerem que mosquitos resistentes podem ser mais suceptíveis ao DEET.

Aedes aegypti is a mosquito of great interest for public health, as it is the vector of arboviruses, such as dengue, chikungunya and Zika. Biological, mechanical and chemical control, with the use of insecticides and repellents, are used against this vector. Repellents are considered one of the best ways to avoid female bites, being those that have N, N-diethylmethylbenzamide (DEET) in the formula the most commercialized, as well as the most studied today. However, resistance to some insecticides such as pyrethroid, can lead to changes in the locomotor activity of mosquitoes. Thus, this study aims to evaluate aspects related to DEET tolerance and resistance to xenobiotics in field Ae. aegypti (Laranjeiras) and laboratory (Rockefeller) strains. Repellency tests were performed with Ae. aegypti for the response to human odor. In each test, 50 females were used, totaling 700 females from the Laranjeiras population and 1500 females from the Rockefeller population. The females were placed in test cages for about two hours in order to adapt to the environment. Subsequently, the repellency test was performed, which consisted of exposing the mosquito to 0.5 mL of DEET (10% in ethanol), which was applied evenly to the human forearm. To diagnose the presence of the kdr mutation in the population of Laranjeiras, 32 females from that population were analyzed. To evaluate the locomotor activity of Ae. aegypti Rockefeller and Laranjeiras females,, the Drosophila Activity Monitor - Trikinetics was used. In the period from September to November 2019, 290 ovitraps were installed in the municipality of Laranjeiras - SE, with a total of 80.3% of reeds with the presence of Aedes eggs, accounting for 15,940 eggs. After conducting the bioassays, it was possible to observe greater sensitivity to DEET in females from the field. In addition, it was also possible to observe the presence of the kdr mutation and greater locomotor activity in this population. Thus, our results suggest that resistant mosquitoes may be more susceptible to DEET.

Resistance of the stable fly, Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae), to cypermethrin in outbreak areas in Midwestern Brazil / Resistência da mosca-dos-estábulos, Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae), à cipermetrina em áreas de surtos no Centro-Oeste brasileiro

Abstract Population explosions of the stable fly (Stomoxys calcitrans) have become a serious concern for livestock producers near sugarcane mills in some regions of Brazil due to the insect's massive reproduction on sugarcane byproducts and waste. Despite the limited efficiency of insecticides for controlling stable fly outbreaks, producers still rely on chemical control to mitigate the alarming infestations in affected areas. This study evaluated the susceptibility of S. calcitrans populations to cypermethrin in the state of Mato Grosso do Sul, Brazil. Stable flies were tested from three field populations and two colonies, established from flies previously collected at sugarcane mills. Wild flies were collected with Nzi traps in areas of sugarcane plantations. Both wild and colonized flies were exposed to eleven concentrations of cypermethrin in impregnated filter paper bioassays. All the populations proved to be resistant to cypermethrin, with resistance factors among field populations ranging from 6.8 to 38.6. The intensive use of insecticides has led to the development of pyrethroid resistance in stable fly populations in the proximities of sugarcane mills in the state of Mato Grosso do Sul.

Resumo Explosões populacionais da mosca-dos-estábulos (Stomoxys calcitrans) tornaram-se uma séria preocupação para a pecuária próxima a usinas de cana-de-açúcar em algumas regiões do Brasil, devido à massiva reprodução da mosca em resíduos e subprodutos do processamento da cana. Apesar da limitada eficiência dos inseticidas no controle dos surtos desta mosca, produtores dependem do controle químico para mitigar as alarmantes infestações nas áreas afetadas. Este estudo objetivou avaliar a suscetibilidade de populações de S. calcitrans a piretroides no estado de Mato Grosso do Sul, Brasil. Moscas-dos-estábulos de três populações de campo e duas colônias, estabelecidas a partir de moscas previamente coletadas em usinas de cana-de-açúcar, foram testadas. Moscas selvagens foram coletadas com armadilhas Nzi em áreas de cana. Moscas coletadas foram expostas a onze concentrações de cipermetrina em bioensaios com papel de filtro impregnado. Todas as populações testadas mostraram-se resistentes ao piretroide, com fatores de resistência variando de 6,8 a 38,6 nas populações de campo. O uso intensivo de inseticidas tem levado ao desenvolvimento de resistência da mosca-dos-estábulos a piretroides em populações próximas a usinas de cana-de-açúcar no estado do Mato Grosso do Sul.